一、凱杰Qiagen介紹
QIAGEN是一家專業(yè)化致力于生物分子樣品制備解決方案的跨國經(jīng)營企業(yè),總部位于德國。1984年,QIAGEN在德國成立,1996年在美國紐約納斯達克上市。QIAGEN擁有超過1000項zhuanli和認(rèn)可證明,在18個國家設(shè)立了分公司,代理商服務(wù)國超過40個,在全球有超過400000的用戶。QIAGEN提供的產(chǎn)品超過500類,包括各種試劑,耗材和自動化純化工作站。這些產(chǎn)品用于樣品采集,穩(wěn)定,核酸或蛋白的分離,純化和檢測中,不僅廣泛的應(yīng)用于科研領(lǐng)域的各個方面,在生物技術(shù),制藥,法醫(yī)研究,食品安全檢測,畜牧業(yè)和分子診斷領(lǐng)域也得到了廣泛的應(yīng)用。QIAGEN產(chǎn)品的zuo越品質(zhì)和在應(yīng)用中的出色表現(xiàn)使得其成為樣品處理中標(biāo)準(zhǔn)的代名詞。
二、凱杰qiagen質(zhì)粒提取試劑盒實驗原理
?Qiagen質(zhì)粒提取試?劑盒的實驗原理?主要基于細菌的培養(yǎng)、收獲和裂解,以及隨后通過特定的緩沖液和操作步驟來純化質(zhì)粒DNA。這個過程涉及幾個關(guān)鍵步驟,包括細菌的培養(yǎng)、收獲、裂解,以及質(zhì)粒DNA的純化。
1. ?細菌的培養(yǎng)?:首先,從瓊脂平板上挑取一個單菌落,接種到含有適當(dāng)抗生素的LB液體培養(yǎng)基中,并在特定條件下培養(yǎng),以便質(zhì)粒DNA能夠自主復(fù)制。
2. ?細菌的收獲和裂解?:通過離心收集細菌,然后使用特定的緩沖液(如Buffer P1)重懸細菌。接著添加Buffer P2并劇烈晃動以裂解細菌,這一步中SDS(十二烷基硫酸鈉)起到變性蛋白質(zhì)的作用,促進細胞壁的裂解。隨后加入冰浴的Buffer P3,通過離心和過濾步驟去除細胞碎片和未裂解的細胞。
3. ?質(zhì)粒DNA的純化?:經(jīng)過上述步驟后,質(zhì)粒DNA被釋放到溶液中。通過使用QIAGEN-tip柱進行進一步的純化,利用特定的緩沖液(如Buffer QBT、Buffer QC和Buffer QN)進行洗滌和洗脫,最終得到較為純凈的質(zhì)粒DNA。
這個過程的關(guān)鍵在于使用特定的緩沖液和操作步驟來最大限度地提取質(zhì)粒DNA,同時去除雜質(zhì),如蛋白質(zhì)和基因組DNA,以確保獲得高質(zhì)量的質(zhì)粒產(chǎn)品。此外,通過加入異丙醇和乙醇進行沉淀和清洗,進一步提高了質(zhì)粒DNA的純度和濃度。
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三、凱杰qiagen質(zhì)粒提取試劑盒目錄表
貨號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
12362 | EndoFree Plasmid Maxi Kit (10) | 10T |
12381 | EndoFree Plasmid Mega Kit (5) | 5T |
12391 | EndoFree Plasmid Giga Kit (5) | 5T |